Каковы ключи к хорошим данным QPCR?

Некоторые общие рекомендации для получения хороших данных qPCR:

1. Высококачественная РНК: для реакций qPCR важно использовать высококачественную РНК с высокой чистотой и целостностью, так как качество РНК может повлиять на точность и воспроизводимость результатов.

2. Калибровочные кривые: важно включать стандартные кривые для каждого анализа qPCR, чтобы обеспечить точную количественную оценку гена-мишени.

3. Надлежащий контроль: наряду с неизвестными образцами, должны быть включены соответствующие положительные и отрицательные средства контроля, такие как нешаблонные средства контроля, для обнаружения любого загрязнения или амплификации неспецифических продуктов.

4. Оптимизация условий реакции: условия для проведения анализа qPCR должны быть оптимизированы, включая температуру отжига, концентрацию праймера и объем реакции.

5. Нормализация данных: Нормализация данных имеет важное значение для учета различий между выборками и сведения к минимуму изменчивости.

6. Репликации: запуск репликатов для каждого образца помогает уменьшить изменчивость и повысить уверенность в результатах.

7. Статистический анализ: следует провести соответствующий статистический анализ для определения значимости результатов и сравнения между группами.

ПРЕВ: Как правильно выбрать центрифужные трубки?

СЛЕДУЮЩИЙ: Факторы, влияющие на точность Pipettor